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局灶性脑缺血动物模型—线栓法简介

2020-3-13 16:26:02点击:
大脑中动脉(Middle cerebral artery, MCA)是人类脑卒中的多发部位,大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型被普遍认为是局灶性脑缺血的标准动物模型,主要方法有线栓法、电凝法、光化学法和血栓栓塞法。
线栓法(thread occlusion of the middle cerebral artery)
1、复制方法
雄性SD大鼠,体重为250~300g。经腹腔注射水合氯醛(350~400mg/kg体重的剂量)或戊巴比妥钠(50~60mg/kg体重的剂量)麻醉,仰卧位固定,剃除颈部毛发,手术区域皮肤常规消毒。切开右侧颈部皮肤,钝性分离胸锁乳突肌和胸骨舌骨肌,显露右侧OCA及迷走神经。结扎 CCA、颈外动脉(exterial cerebral artery, ECA)及其分支动脉。分离右侧颈内动脉(interial cerebral artery, ICA),至鼓泡处可见其颅外分支翼腭动脉,于根部结扎该分支。在ICA近端备线、远端放置动脉夹,在ECA结扎点(距颈内、颈外动脉分叉5mm处)剪一小口,将一直径为0.22~0.249mm(4-0号)的尼龙线经ECA上剪口插入。插入前加热处理使插入端变钝(也可在尼龙线头端用L-多聚赖氨酸涂抹后置肝素中浸泡,使成功率增高,梗塞面积恒定),并做好进入线长度标记。扎紧备线,松开动脉夹,将尼龙线经ECA、ICA分叉处送入ICA,向前进入17~19mm时会有阻挡感,说明栓线已穿过MCA,到达大脑前动脉的起始部,堵塞MCA开口,造成脑组织局部缺血。1~3h后可缓慢退出尼龙线实施再灌注。
(2)模型特点
线栓法的优点为:无须开颅,动物损伤小,MCA闭塞效果较为理想,目前该模型被认为是惟一能观察到再灌流的局灶性脑缺血模型,近年来较为常用。注意点:线选择极为重要,较细时不容易穿到MCA,且缺血不明显;较粗时缺血重,容易造成实验动物的死亡。线要有一定的刚性,才能穿进ICA并穿进颅内,钢性过强则容易穿透动脉引起颅内出血。穿线位置也应当根据实验条件摸索。为提高线拴法大鼠局灶性脑缺血模型的成功率和稳定性,有学者研究了大鼠体重、拴线插入长度和直径与MCAO模型成功的关系,用正交试验法得出造模型的最佳方案是采用大鼠体重为250~300g,线长为17m/n或18mm,线直径为0.28mm制作MCAO模型。成功率高、重复性较好。